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第24章 MD质粒(2 / 2)

根据原论文中提供的思路,设计实验,制备了一种特异性荧光蛋白。

这种荧光蛋白,是一种专用于标记和定位质粒,被命名为ito-dsred,简写为d质粒,其成分主要包括红色荧光蛋白和线粒体亚基蛋白,且进行了相关的线粒体靶向串行设计。

不但可以用来将融合蛋白定位到细胞线粒体,还能在细胞内表达后靶向至线粒体并发出红色荧光。

在整篇论文中,d质粒都是一种很关键的标记物。

若没有d质粒,并非说相关实验就无法开展了,因为还有其他类型的线粒体标记物,但在这个课题中,d质粒最为适合、清淅、精准,能直接观测到线粒体转移的证据,若换其他标记物,情况就会变得十分复杂。

d质粒的制备,许星辰全程自己操作,没让任何人参与,内核的制备技术,在论文没有发表与相关专利没有进入申请流程之前,他都会将之藏着,以免被人抢占了果实。

有了这种特异性荧光蛋白,许星辰再次设计实验,对线粒体进行标记,然后引入野生型tdna的l02细胞和突变型tdna的l04细胞。

通过仪器观察,他发现,癌细胞之间的线粒体转移在20个小时之内,其实很少发生。

但是,过了20个小时以后,可以明显观察到癌细胞的线粒体,通过细胞间的隧道纳米管(tnt)或者细胞外囊泡(evs),转移到了t细胞。

针对这种现象,许星辰直接在细胞中添加细胞松弛素b、transwell、gw4869和y-27632,用以抑制tnt和阻断小evs,并避免细胞直接接触。

结果发现,这些试剂显著抑制了线粒体的转移。

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